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給你提煉一篇博日PCR儀的操作注意事項

釋出時間✘·│₪:2022-03-17   點選次數✘·│₪:373次
 
  簡單的說│☁,PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成│☁,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖複製₪↟·。
 
  目前│☁,常用的技術│☁,可以將一段基因複製為原來的一百億至一千億倍₪↟·。根據DNA擴增的目的和檢測的標準│☁,可以將博日PCR儀分為普通PCR儀│☁,梯度PCR儀│☁,原位PCR儀│☁,實時熒光定量PCR儀四類₪↟·。
 
  博日PCR儀的實驗操作注意事項✘·│₪:
 
  儘管擴增序列的殘留汙染大部分是假陽性反應的原因│☁,樣品間的交叉汙染也是原因之一₪↟·。因此│☁,不僅要在進行擴增反應是謹慎認真│☁,在樣品的收集☁▩✘•、抽提和擴增的所有環節都應該注意✘·│₪:
 
  1.戴一次性手套│☁,若不小心濺上反應液│☁,立即更換手套;
 
  2.使用一次性吸頭│☁,嚴禁與PCR產物分析室的吸頭混用│☁,吸頭不要長時間暴露於空氣中│☁,避免氣溶膠的汙染;
 
  3.避免反應液飛濺│☁,開啟反應管時為避免此種情況│☁,開蓋前稍離心收集液體於管底₪↟·。若不小心濺到手套或桌面上│☁,應立刻更換手套並用稀酸擦拭桌面;
 
  4.操作多份樣品時│☁,製備反應混合液│☁,先將dNTP☁▩✘•、緩衝液☁▩✘•、引物和酶混合好│☁,然後分裝│☁,這樣即可以減少操作│☁,避免汙染│☁,又可以增加反應的精確度;
 
  5.最後加入反應模板│☁,加入後蓋緊反應管;
 
  6.操作時設立陰陽性對照和空白對照│☁,即可驗證PCR反應的可靠性│☁,又可以協助判斷擴增系統的可信性;
 
  7.儘可能用可替換或可高壓處理的加樣器│☁,由於加樣器最容易受產物氣溶膠或標本DNA的汙染│☁,最好使用可替換或高壓處理的加樣器₪↟·。
 
  如沒有這種特殊的加樣器│☁,至少PCR操作過程中加樣器應該專用│☁,不能交叉使用│☁,尤其是PCR產物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區;
 
  8.重複實驗│☁,驗證結果│☁,慎下結論₪↟·。
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